플랫폼 빠른 dna 라이브러리 프렙 키트를 배열하는 MGI 초고속을 목표삼기

플랫폼 빠른 dna 라이브러리 프렙 키트를 배열하는 MGI 초고속을 목표삼기

제품 상세 정보:

원래 장소: 중국
브랜드 이름: GDSBio
인증: ISO9001, ISO13485
모델 번호: KM001 A, KM001 비

결제 및 배송 조건:

최소 주문 수량: 1개 박스
포장 세부 사항: 소규모 포장물 또는 크기는 분배합니다 또는 OEM
배달 시간: 8 작업 일수
지불 조건: L/C (신용장), 인수 인도, D/P (지급도 조건), 전신환, 웨스턴 유니온, 머니그램
공급 능력: 10000은 하루에 / 박스를 권투합니다
최고의 가격 접촉

상세 정보

Cat. 아니오.: KM001 A, KM001 비 상술: KM001-A/24 르크스스 ; KM001-B/96 르크스스
출현: 맑은 액체 주식:
순서 정렬 플랫폼: MGI 시료형: DNA
로고 프린팅: 로고 프린팅으로 운반 포장: 포장
판매 수명: 12개월 저장 조건: -20' C
하이 라이트:

버릴 수 있는 바이러스 수송관

,

VTM 바이러스 수송관

,

프티엠 테스트는 면봉으로 지하철을 탑니다

제품 설명

빨리 MGI를 위한 dna 라이브러리 프렙 키트

[상품 이름]

빨리 MGI를 위한 dna 라이브러리 프렙 키트

[Cat. 아니오./Spec.]

KM001-A/24 르크스스 ; KM001-B/96 르크스스 ; sack/ 6 르크스스를 샘플링하세요

[제품 설명]

MGI 초고속 시퀀스화 플랫폼을 목표삼을 때, 이 장비는 한 튜브에서 편리하고 보편적 dna 라이브러리 구축 스킴을 제공합니다. 그것은 단부 수리와 A-테일링을 단일 스텝에 결합시키고 대단히 매우 라이브러리 구성의 시간을 줄이고 지루한 조치에 의해 초래된 에러를 줄이면서, 시약이 사용 전에 혼합됩니다. 마지막 준비, 어댑터 결찰, 증폭과 분할된 이중 쇄 dna의 정화는 약 2 시간 이내에 수행될 수 있습니다. 완전한 라이브러리 정량화는 드스드나 형광 색소 방법 (예를 들면, 열 큐빗 플렉스 형광계) 또는 자료실을 적정 농도로 희석시키는 것 뒤에 절대적 정량화 PCR에 의해 수행될 수 있습니다.

[시료형]

애플리케이션 시료형 권고된 양
전체 게놈 연속물 분석 고급 품질 복합 유전체 50ng-1μg
전체 엑솜의 표적 포획 시퀀스화 고급 품질 복합 유전체 10ng-1μg
전체 게놈의 표적 포획 시퀀스화 FFPE DNA ≥50ng
전체 게놈의 표적 포획 시퀀스화 cfDNA/ctDNA ≥100pg
전체 게놈 연속물 분석 미생물 게놈 1ng-1μg
칩-세큐 칩 DNA ≥100pg
목표로 지정된 시퀀스화 앰플리콘 ≥100pg

[저장 조건 & 판매 수명]

모든 시약은 C. 결찰 완충액이 저온에 촉진시키기 위해 크리스탈을 위해 정상적인 -20'에 저장되어야 합니다, 그것이 사용 전에 실온에 균형화되어야 합니다. 제품은 12개월에 효과적입니다.

[성분]

성분 24 르크스스 96 르크스스
단부 수리 & A-테일링 혼합 480 μl 4×480 μl
빨리 dna 리가아제 120 μl 2×240 μl
빠른 결찰 완충액 600 μl 4×600 μl
2× 하이파이장치 자료실 PCR 마스터는 혼합됩니다 600 μl 4×600 μl
MGI*를 위한 프라이머 믹스 120 μl 480 μl

* 한 샘플, #KM002 이상과 #KM003이 있다면 어댑터 프라이머 믹스는 권고됩니다. 이 장비는 일련의 프라이머를 제공합니다, 프라이머 시퀀스가 다음과 같습니다 :

5'-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3'

5'-GAACGACATGGCTACGA-3'

기록 :추천된 선택 비즈 : #NC1011 그드스푸레 DNA 선택 맥비드스 또는 암푸레 XP 비즈.

[기록]

1. 우리는 2개 종류의 범용 어댑터 프라이머 세트 (개별적으로 구입되는 #KM002와 #KM003)를 제공하지만, 그러나 고객들이 또한 타회사들로부터 선택하거나 그들의 MGI 시퀀스화 플랫폼을 위한 어댑터를 합성할 수 있습니다. 또한 매우 어댑터는 어댑터 다이머의 형성으로 이어질 것이고 불충분한 어댑터가 로우 도서관 생산량으로 이어질 것입니다. 그러므로, 적절한 어댑터 집중은 자료실의 집중과 품질을 결정합니다. DNA 입력의 다른 양을 위한 추천된 어댑터 집중은 다음 표에 나타납니다 :

어댑터의 표 1 추천 사용 집중

DNA는 입력했습니다 Conc를 권고했습니다. 어댑터를 위해 어댑터 :삽입물 몰 비율 GDS 어댑터 희석 Degrees*
1μg 10μM 10:1 어떤 희석
500 NG (좋지않다) 10μM 20:1 어떤 희석
250 NG (좋지않다) 10μM 40:1 어떤 희석
100 NG (좋지않다) 7.5μM 100:1 3:4
50 NG (좋지않다) 5μM 200:1 1:2
25 NG (좋지않다) 2.5μM 200:1 1:4
1 NG (좋지않다) 1μM 200:1 1:10

* 희석액에 어댑터의 부피 비로 표현됩니다

2. 2× 하이파이장치 도서관 PCR 마스터 믹스에서 사용된 효소는 5 '-3' 폴리메라아제와 3 '-5' 엑소누클레아제 활성을 가지고 있는 비 가족 dna 폴리머라제이지만, 5 '-3' 엑소누클레아제 활성이 결핍됩니다. 그것은 고충실도와 동질성과 강한 지탱할 수 있는 종합 능력을 가지고 있습니다. 증폭 주기의 수의 엄격한 제어는 특히 라이브러리 아웃풋에 중요합니다. 다음 표는 DNA 입력의 다른 양에 해당한 증폭 주기의 추천된 번호를 보여줍니다 :

표 2는 증폭 주기의 숫자에게 다른 샘플 입력에 해당되기를 권고했습니다

DNA를 입력하세요 증폭 주기의 추천된 번호
100 NG (좋지않다) 자료실 1μg 자료실
1μg 0 2-5
500 NG (좋지않다) 0 2-5
250 NG (좋지않다) 1-3 5-7
100 NG (좋지않다) 2-4 6-8
50 NG (좋지않다) 4-6 8-10
25 NG (좋지않다) 5-7 9-12
10 NG (좋지않다) 7-9 11-13
5 NG (좋지않다) 9-11 13-14
2.5 NG (좋지않다) 10-12 14-16
1 NG (좋지않다) 11-13 15-17

기록 : 1. 위에서 말한 테이블은 단지 참조를 위한 150 베이시스 포인트 표준 dna를 사용하는 테스트 결과를 보여줍니다.

2. 만약 불완전한 연결기가 사용되면, 최소 되풀이수 (1-3)가 완전한 라이브러리를 획득하기 위해 확대되어야 합니다.

3. 만약 입력 DNA의 품질이 가난하거나 사이즈 선택이 라이브러리 구성 동안 실행되면, 증폭 주기의 숫자가 적절하게 증가하여야 합니다.

[표준 라이브러리 구축 과정]

단부 수리

기록 : 분할된 DNA가 45 μl을 초과하면 이 조치 또는 버퍼가 단부 수리 버퍼와 양립할 수 없기 전에 자기성 비드 정화는 먼저 수행되어야 합니다.

1. 200 μl PCR 튜브에서 다음의 반응으로 준비합니다 :

시약 음량
분할된 DNA 변수
단부 수리 & A-테일링 혼합 20 μl
ddH2O 65 μl에

2. 점잖게 소용돌이치게 하고 다른 사람들과 친하게 지내고, 간략하게 원심기로 분리하고 튜브의 밑바닥까지 모든 액체를 수집하기 위해 간략하게 아래 회전하세요.

3. 다음의 반응을 열 순환기에서 수행하세요 :

온도 타임즈 지
20' C 15 분
65' C 15 분
4' C

어댑터 결찰

1. 마지막 준비 뒤에 최대한 빨리 결찰 반응을 계속하세요.

2. 표 1에 따라 어댑터를 희석하세요.

3. 다음과 같은 반응 시스템으로 준비합니다 :

시약 음량
단부 수리와 A-테일링 제품 65 μl
빠른 결찰 완충액 25 μl
빨리 dna 리가아제 5 μl
MGI를 위한 어댑터 X 5 μl
전체 100 μl

4. 점잖게 소용돌이치게 하고 다른 사람들과 친하게 지내고, 간략하게 원심기로 분리하고 튜브의 밑바닥까지 모든 액체를 수집하기 위해 간략하게 아래 회전하세요.

5. 다음의 반응을 열 순환기에서 수행하세요 :

온도 타임즈 지
20' C 15 분
4' C

PCR 정화 / 사이즈 선택 (특별한 자기성 비드 크기가 실제 견본 크기에 따라 조정되어야 합니다)을 위한 권고된 솔루션

1. 적절한 원심 분리관으로의 100 μl 라이게이션 생성물로 준비합니다.

2. 재현가된 DNA 선택 자석 비즈 중 100 μl을 샘플에 더하세요. 점잖게 10 번 (또는 30 S 동안 소용돌이) 동안 피펫으로 부세요. 실온에 5 분 동안 샘플을 배양하세요.

3. 표면에 뜨는 물질로부터 비즈를 분리하기 위해 튜브를 적절한 마그네틱 랙에 두세요. 해결책이 명백할 때, 주의깊게 피펫으로 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요 (비즈를 포기하지 마세요).

4. 마그네틱 랙에 있는 동안 튜브에 새롭게 에탄올을 차려준 80% 중 200 μl을 추가하세요. 30 S 동안 실온에 잠복하고, 그리고 나서 주의깊게 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요 (비즈를 방해하지 마세요).

5. 총 2 세정을 위해 4 단계 한 번을 반복하세요.

기록 : 두번째 세정 뒤에 모든 눈에 보이는 액체를 제거하기 위해 확신하세요.

6. 튜브가 열린 규제와 마그네틱 랙에 있는 동안 자석 비즈의 표면이 어떤 명백한 해설도 가지고 있지 않을 때까지 공기는 비즈를 말립니다.

기록 : 전혀 과잉 건조에게 비즈를 주지 마시오 그러면 이것은 DNA의 더 낮은 회복의 결과가 될 수 있습니다. 비즈가 부서지기 시작할 때, 그들은 너무 마릅니다.

7. 튜브를 마그네틱 랙에서 제거하세요. 22 μl 용출 버퍼 (10mM 트리스-하크들, pH8.0-8.5)를 튜브에 더하세요. 적어도 10 번 위 아래로 피펫으로 계량함으로써 또는 30 S 동안 볼텍스 믹서에 다른 사람들과 친하게 지내세요. 실온에 3-5 분 동안 잠복하세요.

8. 튜브를 마그네틱 랙에 두세요. 5 분 (또는 언제 수용액이 명백한지) 뒤에 20 μl 표면에 뜨는 물질을 새로운 관으로 이송하세요. 선택은 완료되고 선별적 DNA가 후속 실험을 위해 사용되거나 오랫동안 -20' C에 저장될 수 있습니다.

자료실 증폭

1. 200 μl PCR 튜브에서 다음의 반응으로 준비합니다 :

시약 음량
정화 또는 사이즈 선택 뒤에 있는 라이게이션 생성물 20 μl
2× 하이파이장치 자료실 PCR 마스터는 혼합됩니다 25 μl
MGI를 위한 프라이머 믹스 5 μl
전체 50 μl

2. 점잖게 소용돌이치게 하고 다른 사람들과 친하게 지내고, 간략하게 원심기로 분리하고 튜브의 밑바닥까지 모든 액체를 수집하기 위해 간략하게 아래 회전하세요.

3. 다음의 반응을 열 순환기에서 수행하세요 :

온도 타임즈 지 사이클 횟수
95' C 3 분 1
98' C 20 초

 

표 2에 따른 선택하는 적절한 되풀이수

60' C 15 초
72' C 30 초
72' C 5 분 1
4' C -

PCR 정화 / 사이즈 선택 (특별한 자기성 비드 크기가 실제 견본 크기에 따라 조정되어야 합니다)을 위한 권고된 솔루션

1. 적절한 원심 분리관으로의 50 μl 라이게이션 생성물로 준비합니다.

2. 재현가된 DNA 선택 자석 비즈 중 45 μl을 샘플에 더하세요. 점잖게 10 번 (또는 30 S 동안 소용돌이) 동안 피펫으로 부세요. 실온에 5 분 동안 샘플을 배양하세요.

3. 표면에 뜨는 물질로부터 비즈를 분리하기 위해 튜브를 적절한 마그네틱 랙에 두세요. 해결책이 명백할 때, 주의깊게 피펫으로 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요 (비즈를 포기하지 마세요).

4. 마그네틱 랙에 있는 동안 튜브에 새롭게 에탄올을 차려준 80% 중 200 μl을 추가하세요. 30 S 동안 실온에 잠복하고, 그리고 나서 주의깊게 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요 (비즈를 방해하지 마세요).

5. 총 2 세정을 위해 4 단계 한 번을 반복하세요.

기록 : 두번째 세정 뒤에 모든 눈에 보이는 액체를 제거하기 위해 확신하세요.

6. 튜브가 열린 규제와 마그네틱 랙에 있는 동안 자석 비즈의 표면이 어떤 명백한 해설도 가지고 있지 않을 때까지 공기는 비즈를 말립니다.

기록 : 전혀 과잉 건조에게 비즈를 주지 마시오 그러면 이것은 DNA의 더 낮은 회복의 결과가 될 수 있습니다. 비즈가 부서지기 시작할 때, 그들은 너무 마릅니다.

7. 튜브를 마그네틱 랙에서 제거하세요. 22 μl 용출 버퍼 (10mM 트리스-하크들, pH8.0-8.5)를 튜브에 더하세요. 적어도 10 번 위 아래로 피펫으로 계량함으로써 또는 30 S 동안 볼텍스 믹서에 다른 사람들과 친하게 지내세요. 실온에 3-5 분 동안 잠복하세요.

8. 튜브를 마그네틱 랙에 두세요. 5 분 (또는 언제 수용액이 명백한지) 뒤에 20 μl 표면에 뜨는 물질을 새로운 관으로 이송하세요. 선택은 완료되고 선별적 DNA가 1-2 주 동안 2-8' C에 저장되거나 오랫동안 -20' C에 저장될 수 있습니다.

[부록은] 계획을 이중의 측면을 가진 선택에게 권고했습니다

만약 더블 라운드 선택이 요구되면, 우리가 예상된 라이브러리 크기에 따라 적절한 자기성 비드 크기를 선택하기 위해 다음과 같은 계획을 제공합니다. 사이즈 선택은 단부 수리 전에 또는 증폭 뒤에 수행될 수 있습니다. 2 또는 많은 더블 라운드 선택은 매우 자료실 생산량을 감소시킬 것입니다.

100 μl에 대한 아래 표에서 도서관 크기를 충전하세요. 예상된 라이브러리 크기에 따라 2개 라운드에서 자석 비즈의 크기를 선택하세요. 그리고 다음과 같은 교육에 따라 선택 동작을 수행하세요.

더블 라운드 선택을 위한 자석 비즈의 표 3 권고된 양

예상된 라이브러리 크기 150 베이시스 포인트 200 베이시스 포인트 250 베이시스 포인트 300 베이시스 포인트 400 베이시스 포인트 500 베이시스 포인트 600 베이시스 포인트 700 베이시스 포인트
비즈(μl)의 크기 라운드 1 100 90 80 70 60 55 50 45
라운드 2 30 20 20 20 20 15 15 15

1. 200μl PCR 튜브에서 100 μl에 대한 도서관 크기를 충전하고, A로서 표시했습니다. 튜브 A에 표 3 (라운드 1)에 따라 자석 비즈의 어떤 크기를 추가하세요. 점잖게 30 S 동안 피펫으로 부세요. 실온에 5 분 동안 샘플을 배양하세요.

2. 표면에 뜨는 물질로부터 비즈를 분리하기 위해 튜브 A를 적절한 마그네틱 랙에 두세요. 해결책이 명백할 때, 주의깊게 새로운 튜브에 표면에 뜨는 물질을 제거하고 비라고 그것을 칭하세요. 포기 비즈.

3. 튜브 비에 표 3 (라운드 2)에 따라 자석 비즈의 어떤 크기를 추가하세요. 점잖게 30 S 동안 피펫으로 부세요. 실온에 5 분 동안 샘플을 배양하세요. 튜브 비를 마그네틱 랙에 두세요. 해결책이 명백할 때, 주의깊게 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요.

4. 마그네틱 랙에 있는 동안 튜브 비에 새롭게 에탄올을 차려준 80% 중 200 μl을 추가하세요. 30 S 동안 실온에 잠복하고, 그리고 나서 주의깊게 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요 (비즈를 방해하지 마세요).

5. 총 2 세정을 위해 6 단계 한 번을 반복하세요.

기록 : 두번째 세정 뒤에 모든 눈에 보이는 액체를 제거하기 위해 확신하세요.

6. 튜브 비가 열린 규제와 마그네틱 랙에 있는 동안 자석 비즈의 표면이 어떤 명백한 해설도 가지고 있지 않을 때까지 공기는 비즈를 말립니다.

기록 : 전혀 과잉 건조에게 비즈를 주지 마시오 그러면 이것은 DNA의 더 낮은 회복의 결과가 될 수 있습니다. 비즈가 부서지기 시작할 때, 그들은 너무 마릅니다.

7. 튜브 비를 마그네틱 랙에서 제거하세요. 22 μl 용출 버퍼를 튜브에 더하세요. 적어도 10 번 위 아래로 피펫으로 계량함으로써 또는 30 S 동안 볼텍스 믹서에 다른 사람들과 친하게 지내세요. 실온에 3-5 분 동안 잠복하세요.

기록 : 목표로 지정된 캡쳐가 수행되지 않을 것이라면, 용출을 위해 용출 버퍼 (10mM 트리스-하크들, 페하 8.0-8.5)를 추가하세요. 그렇지 않았다면, 소독된 초순수는 용출을 위해 사용되어야 합니다.

  • 관 비를 마그네틱 랙에 두세요. 새로운 관에 대한 열전달 20 μl 표면에 뜨는 물질.

 

단지 연구 용도를 위해

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그드스비오는 연구 개발, 생산에 주력하는 첨단 기업이고 고품질 생명 과학 제품을 판매입니다. 회사는 일반적 PCR, 형광 양적 PCR, NGS 저장, 핵산 전기영동과 다른 분자 생물학 기술에 초점을 맞추면서, 핵심으로서의 PCR 기술로, 완전한 제품 라인을 가지고 있고, 분자 조사 반응제, 분자 시험관 내에서 증상을 나타내는 원료, 핵산 추출과 검출 시약과 다른 제품을 개발했습니다.

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