NGS 라이브러리 구성 그드스푸레 DNA 사이즈 선택과 정화 맥비드스

제품 설명

그드스푸레 DNA 선택 맥비드스
Cat. 번호 : NC1011, NC1012, NC1013
 
성분

 
저장
이 시약은 2-8' Ｃ에 유지되어야 합니다. 얼지 마세요. 열리지 않으면 판매 수명은 2년입니다.
 
기술
그드스푸레 DNA 선택 맥비드스는 정확하게 정화되기 위해 고성능 초상자성 비즈와 우수한 버퍼 비율을 사용하고 dna 단편을 150 베이시스 포인트 내지 1000 베이시스 포인트에서 선택하거나, 더 커서 편평해집니다. DNA 라이브러리 구성의 작동 중에 도입한 초과하는 뉴클레오티드, 소금, 효소와 다른 음란은 정제된 프래그먼트를 획득하기 위해, 단순 세척 과정 뒤에 제거될 것이며, 그것이 직접적으로 시퀀스화, 혼성화, PCR와 효소 소화와 같은 하류로 흐르는 적용에서 사용될 수 있습니다. 그드스푸레 DNA 선택 맥비드스는 설명서와 자동 포맷에 의해 사용될 수 있습니다.
 
애플리케이션

차세대 시퀀스화 (NGS), 생어 시퀀스화, 큐피크레, 드드피크레와 마이크로배열, 기타 등등 로 사이즈 선택과 정화.
 

실험 전에 예비 작업

1. 세척액 : 신선한 80% (V/V) 에탄올 용액

2. 엘루언트 솔루션 : 무뉴클레아제 물 또는 TE 버퍼

3. 소용돌이

4. 마그네틱 랙

5. 선택 범위의 정확도를 보증하기 위해, DNA 샘플 부피는 ≥ 50 μL이어야 합니다

6. 실험 전에 냉장고로부터 자석 비즈를 꺼내고 사용 전에 20 분 이상 동안 실온에 그들을 따뜻하게 하세요

프로토콜

DNA 중에서 사이즈 선택은 특정 크기 (단일면 선택)보다 크서 분해됩니다

1. 적절한 원심 분리관으로의 50 μL DNA 표본으로 준비합니다.

2. 샘플에 표 1에서 1번째 비즈 부가 비에 따라 재현가된 그드스푸레 DNA 선택 맥비드스의 어떤 크기를 추가하세요. 점잖게 10 번 (또는 30 Ｓ 동안 소용돌이) 동안 피펫으로 부세요. 실온에 5 분 동안 샘플을 배양하세요.

샘플에서 250 베이시스 포인트보다 큰 모든 부분을 선택하기 위해 예를 들면, 40 μL (0.80X) 자기를 띤 비드 현탁을 추가하세요.

3. 표면에 뜨는 물질로부터 비즈를 분리하기 위해 튜브를 적절한 마그네틱 랙에 두세요. 해결책이 명백할 때, 주의깊게 피펫으로 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요 (비즈를 포기하지 마세요).

4. 마그네틱 랙에 있는 동안 튜브에 새롭게 에탄올을 차려준 80% 중 200 μl을 추가하세요. 30 Ｓ 동안 실온에 잠복하고, 그리고 나서 주의깊게 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요 (비즈를 방해하지 마세요).

5. 총 2 세정을 위해 4 단계 한 번을 반복하세요.

기록 : 두번째 세정 뒤에 모든 눈에 보이는 액체를 제거하기 위해 확신하세요.

6. 튜브가 열린 규제와 마그네틱 랙에 있는 동안 자석 비즈의 표면이 어떤 명백한 해설도 가지고 있지 않을 때까지 공기는 비즈를 말립니다.

기록 : 전혀 과잉 건조에게 비즈를 주지 마시오 그러면 이것은 DNA의 더 낮은 회복의 결과가 될 수 있습니다. 비즈가 부서지기 시작할 때, 그들은 너무 마릅니다.

7. 튜브를 마그네틱 랙에서 제거하세요. 비즈에서 30-40 μl 무뉴클레아제 물 또는 TE 버퍼로 DNA 목표를 녹여서 분출하세요. 적어도 10 번 위 아래로 피펫으로 계량함으로써 또는 30 Ｓ 동안 볼텍스 믹서에 다른 사람들과 친하게 지내세요. 실온에 3-5 분 동안 잠복하세요.

8. 튜브를 마그네틱 랙에 두세요. 5 분 (또는 언제 해결책이 명백한지) 뒤에 표면에 뜨는 물질을 새로운 튜브로 이송하세요. 선택은 완료되고 선별적 DNA가 후속 실험을 위해 사용되거나 오랫동안 -20' Ｃ에 저장될 수 있습니다.

특별한 크기 간격 (이중의 측면을 가진 선택)에서 dna 단편 중에서 사이즈 선택

1. 적절한 원심 분리관 안으로 50 μL DNA 표본으로 준비하고 A라고 그것을 칭하세요.

2. 튜브 A에 표 1에서 1번째 비즈 부가 비에 따라 재현가된 그드스푸레 DNA 선택 맥비드스의 어떤 크기를 추가하세요. 점잖게 10 번 (또는 30 Ｓ 동안 소용돌이) 동안 피펫으로 부세요. 실온에 5 분 동안 샘플을 배양하세요.

샘플에서 250 베이시스 포인트에 관한 부분을 선택하기 위해 예를 들면, 40 μL (0.80X) 자기를 띤 비드 현탁을 추가하세요.

• 표면에 뜨는 물질로부터 비즈를 분리하기 위해 튜브 A를 적절한 마그네틱 랙에 두세요. 해결책이 명백할 때, 주의깊게 새로운 튜브에 표면에 뜨는 물질을 제거하고 비라고 그것을 칭하세요. 포기 비즈.

4. 튜브 비에 표 1의 2번째 비즈 부가 비에 따라 자기성 비드 중단의 어떤 크기를 추가하세요. 점잖게 10 번 (또는 30 Ｓ 동안 소용돌이) 동안 피펫으로 부세요. 실온에 5 분 동안 샘플을 배양하세요.

샘플에서 250 베이시스 포인트에 관한 부분을 선택하기 위해 예를 들면, 10 μL (0.20X) 자기를 띤 비드 현탁을 추가하세요.

5. 튜브 비를 마그네틱 랙에 두세요. 해결책이 명백할 때, 주의깊게 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요.

6. 마그네틱 랙에 있는 동안 튜브 비에 새롭게 에탄올을 차려준 80% 중 200 μl을 추가하세요. 30 Ｓ 동안 실온에 잠복하고, 그리고 나서 주의깊게 표면에 뜨는 물질을 제거하고 포기하세요 (비즈를 방해하지 마세요).

7. 총 2 세정을 위해 6 단계 한 번을 반복하세요.

기록 : 두번째 세정 뒤에 모든 눈에 보이는 액체를 제거하기 위해 확신하세요.

8. 튜브가 열린 규제와 마그네틱 랙에 있는 동안 자석 비즈의 표면이 어떤 명백한 해설도 가지고 있지 않을 때까지 공기는 비즈를 말립니다.

기록 : 전혀 과잉 건조에게 비즈를 주지 마시오 그러면 이것은 DNA의 더 낮은 회복의 결과가 될 수 있습니다. 비즈가 부서지기 시작할 때, 그들은 너무 마릅니다.

9. 튜브 비를 마그네틱 랙에서 제거하세요. 비즈에서 30-40 μl 무뉴클레아제 물 또는 TE 버퍼로 DNA 목표를 녹여서 분출하세요. 적어도 10 번 위 아래로 피펫으로 계량함으로써 또는 30 Ｓ 동안 볼텍스 믹서에 다른 사람들과 친하게 지내세요. 실온에 3-5 분 동안 잠복하세요.

10. 튜브 비를 마그네틱 랙에 두세요. 5 분 (또는 언제 해결책이 명백한지) 뒤에 표면에 뜨는 물질을 새로운 튜브로 이송하세요. 선택은 완료되고 선별적 DNA가 후속 실험을 위해 사용되거나 오랫동안 -20' Ｃ에 저장될 수 있습니다.

표 1 : 사이즈 선택을 위한 권고된 조건

기록

1. 사용 전에 주의깊게 설명서를 읽고 교육에 따라 작동하세요.

2. 원심 분리관에서 에탄올은 용출 효율을 보증하기 위해서 용출 전에 최대한 제거되어야 합니다.

3. 용리액 부피는 실험 요구 그러나 적어도 20 μL에 따라 조정될 수 있습니다.

4. 자석 비즈는 원심분리, 동결과 다른 작동을 회피하여야 합니다. 사용 전에, 비즈 중단은 완전히 극소용돌이와 다른 방법에 의해 섞이고 실온에 재미를 붙이기 위해 20 분 이상 동안 위치될 수 있습니다.

5. DNA 손실을 줄이기 위해 소용돌이와 피펫팅 작동 동안 튜브 커버에 매달리는 액체를 회피하세요.
 
그드스비오는 질 생명 과학 제품의 개발, 생산 판매에 집중된 첨단 기술 회사입니다. 회사는 보통 PCR, 휘황한 양적 PCR, NGS 라이브러리 구성, 핵산 전기영동과 다른 분자 생물학 기술에 초점을 맞추면서, 핵심으로서의 PCR 기술로, 완전한 제품 라인을 가지고 있고, 분자 과학적 조사 반응제, 분자 시험관 내에서 증상을 나타내는 원료, 핵산 추출과 검출 시약과 다른 제품을 개발했습니다.